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Elisa试剂盒供应商:人腮腺炎(Mumps)elisa试剂盒

缅甸银河国际YUEDUCISHU:650    FABUSHIJIAN:2018/3/15 11:46:35

Elisa试剂盒供应商:人腮腺炎(Mumps)elisa试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

实验原理

本试剂盒应用间接法测定标本中人腮腺炎(Mumps)水平。用纯化的人腮腺炎(Mumps)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的腮腺炎(Mumps)标准品和未知浓度的腮腺炎(Mumps)待检样品,温育后,加入生物素标记的抗IgG抗体,再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的腮腺炎(Mumps)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人腮腺炎(Mumps)浓度。

人腮腺炎(Mumps)elisa试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1   标准品S1640IU/L0.5ml×1

2链霉亲和素-HRP6ml×1   标准品S2320IU/L0.5ml×1

3酶标包被板12孔×8   标准品S3160IU/L0.5ml×1

4生物素标记的抗-IgG抗体6ml×1   标准品S480IU/L0.5ml×1

5显色剂A6ml×1   标准品S540IU/L0.5ml×1

6显色剂B6ml×1/   说明书1

7终止液6ml×1   封板膜2

标本要求

1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

人腮腺炎(Mumps)elisa试剂盒操作步骤

1.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50µl,在样本反应孔中加入50微升样本,盖上封板膜,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。

3.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

4.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复4次,拍干。

5.加生物素标记的抗-IgG抗体:每孔加入生物素标记的抗-IgG抗体50µl37℃温育30分钟

6.洗涤:操作同4

7.加链霉亲和素-HRP:每孔加入50µl的链酶亲和素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

8.洗涤:操作同4

9.显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值待入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

人腮腺炎(Mumps)elisa试剂盒注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间*控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*后乘以稀释倍数(×5×n)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。

7.严格按照人腮腺炎(Mumps)elisa试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

线性范围:

20IU/L-640IU/L

保存条件及有效期

1.试剂盒保存:2-8℃。

2.有效期:6个月

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